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可以作為AsahipakES系列流動相的緩沖液鹽濃度為20~600mM。不要使用純水,因為純水會使色譜柱劣化。具體請參考下表??梢允褂肗aCl,KCl,Na2SO4和K2SO4等的水溶液也可以和緩沖溶液配合使用。AsahipakES-502C7C作為流動相使用的緩沖溶液,必須和緩沖離子具有相同的正電荷,且在使用的pH條件下有足夠的緩沖能力。pHrangeBuffer3.8-4.3Sodiumformate4.3Sodiumsuccinate4.8-5.2Sodiumaceta...
常用流動相可以使用下述緩沖溶液或者氯化鈉、硫酸鈉、硫酸鉀等鹽溶液。而且也可以在緩沖溶液中添加鹽??傷}濃度一般為20mM~1M。乙二醇和2-丙醇等極性有機溶劑,可以上限為20%(v/v)。梯度洗脫時請按下述順序進(jìn)行色譜柱的平衡。緩沖液A(低離子強度)通夜10mL。緩沖液B(高離子強度)通夜40mL置換成正確的反離子。緩沖液A通夜15mL平衡。IECQA-825、DEAE-825作為流動相使用的緩沖溶液,必須和緩沖離子具有相同的正電荷,且在使用的pH條件下有足夠的緩沖能力。pHr...
IECCM-825和AsahipakES-502C的填料是鍵合了羧甲基的弱陽離子交換樹脂。由于離子交換基的pKa值為5.7,所以此色譜柱適用于堿性蛋白的分析。IECCM-825的填充基質(zhì)為聚羥基甲基丙烯酸酯,ES-502C的填充基質(zhì)為聚乙烯醇。由于蛋白質(zhì)的分離不僅僅是離子交換,還有一定程度運用反相模式的原理。所以填料基質(zhì)的不同也可能對分離產(chǎn)生一定影響。
IECSP-825的填料是鍵合了磺基丙基的強陰離子交換樹脂。由于陰離子交換基的pKa為2.3,所以此款色譜柱可以在很大pH范圍的流動相條件下使用。使用無孔填料的SP-FT4A適用于快速分析。
IECDEAE-825和AsahipakES-502N的填料是鍵合了二乙基氨基乙基的弱陰離子交換樹脂。二乙基氨基乙基的pKa為7.8,所以適用于進(jìn)行酸性蛋白質(zhì)的分析。
IECQA-825的填料是在強陰離子交換樹脂上鍵合了季銨。這款色譜柱可以在很大pH范圍的流動相條件下使用。季銨的pKa為11.7。
請按照如下步驟進(jìn)行ShodexGPC色譜柱的溶劑置換。置換流動相時,將色譜柱加熱至40-60°C,并以低于正常流速一半的流速通液。流動相的通液量是每根色譜柱體積的3到5倍?!臼孪却_認(rèn)】?請先參考油溶性SEC(GPC)色譜柱溶劑置換性。?請確認(rèn)色譜柱原有溶劑和欲替換有機溶劑的混合性。(1)更換為可互溶溶劑時先用色譜柱原有溶劑和欲置換溶劑1:1的混合溶劑進(jìn)行置換,再置換為欲置換溶劑。(例)從THF置換為氯仿先用THF和氯仿1:1的混合溶液進(jìn)行置換,再置換為氯仿。(2)溶劑互溶性低...
1.LF-804的特長以下是使用THF作為流動相分析環(huán)氧樹脂的分析實例。使用不同排阻限的色譜柱混合分析樣品,會出現(xiàn)拐點。即使是使用標(biāo)準(zhǔn)曲線直線性很好的混合填料色譜柱,也會產(chǎn)生拐點。shodex為了客服混合填料色譜柱的缺點,研究和開發(fā)了一種粒子內(nèi)含有分子量分布范圍非常廣泛的細(xì)孔多分散性填料(LF-804)。此色譜柱在分子量300~2,000,000范圍內(nèi),都能保持標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線性。使用此色譜柱可以避免使用不同色譜柱串聯(lián)和使用混合填料色譜柱時出現(xiàn)拐點的問題。(圖1)2.酚醛樹脂的...
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