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反相和離子交換模式來分離樣品。這款色譜柱對(duì)于分離蛋白質(zhì)和核酸這樣的酸性成分和堿性成分同時(shí)存在的
樣品非常有效。原則上樣品是根據(jù)酸性、中性、堿性的順序洗脫。然而,調(diào)整流動(dòng)相的組成也可以調(diào)整分離結(jié)果。
1) 使用中性/酸性流動(dòng)相的場(chǎng)合
酸性樣品 | 由于離子排阻模式的作用,物質(zhì)被很快洗脫。 |
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中性樣品 | 物質(zhì)由反相模式分離。 |
堿性樣品 | 由于離子交換模式的作用,物質(zhì)的洗脫很慢。 |
2) 使用堿性流動(dòng)相的場(chǎng)合
酸性樣品 | 樣品基本上在Vo的位置一起洗脫,不過酸性樣品分子量特別大的時(shí)候,也不排除被色譜柱保留的可能性。 |
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中性樣品 | 物質(zhì)由反相模式分離。 |
堿性樣品 | 如果流動(dòng)相的pH值高于樣品的pKa值,由于堿性樣品的解離被抑制,樣品通過反相模式分離。反之則通過離子交換模式分離。 |
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